游离脂肪酸含量测定试剂盒 微量法
产品名称: 游离脂肪酸含量测定试剂盒 微量法
英文名称: Micro Free Aliphatic Acid Content Assay Kit
产品编号: BC0595
产品价格: 0
产品产地: 北京市通州区马驹桥联东U谷85A三
品牌商标: Solarbio
更新时间: 2025-10-28T13:18:21
使用范围: null
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产品内容:
提取液:液体100 mL×1瓶,室温保存。
试剂一:自备。实验前一天,取一个玻璃瓶,按照正庚烷:无水甲醇:氯仿=24:1:25的比例配置(自备),盖紧后混匀,室温保存。
试剂二:液体6 mL×1瓶,室温保存。
试剂三:粉剂×2瓶,4℃保存。临用前在试剂瓶中加入13mL无水乙醇,充分溶解,4℃可保存一周。
标准品:粉剂×1瓶,10mg棕榈酸,室温保存。临用前把试剂转移到10 mL玻璃瓶中,加入7.8 mL氯仿充分溶解,即为5μmol/mL的棕榈酸标准溶液。
产品说明:
FFA既是脂肪水解的产物,又是脂肪合成的底物。血清中FFA的浓度与脂类代谢、糖代谢、内分泌功能有关。
FFA与铜离子结合形成脂肪酸铜盐,并溶于氯仿;利用铜试剂法测定铜离子含量,即可推算出游离脂肪酸含量。
自备仪器和用品:
研钵、冰、台式离心机、可调式移液枪、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、一个25 mL玻璃瓶、一个15mL玻璃瓶、正庚烷、无水甲醇、氯仿(****)、无水乙醇和蒸馏水。
操作步骤:
一、样品中FFA提取:
1、血清中FFA测定:将所取血液,室温静置1 h 后,于4 ℃离心机3500 rpm离心15min,取上层血清置于-20℃冰箱保存,待测。
2、组织中FFA含量测定:组织用生理盐水冲洗干净后,用吸水纸吸取表面水分,称取约0.1g,加入1.0 mL提取液,匀浆后,8000rpm,4℃离心10min,取上清液,待测。
二、测定:
1. 分光光度计预热30 min以上,调节波长到550 nm,无水乙醇调零。
2. 试剂二在37℃水浴中预热30 min以上。
3. 标准品的稀释:将标准品稀释成1、0.8、0.6、0.4、0.2、0.1、0.05μmol/mL。
4. 按下表在1.5mL离心管中加入相应试剂
对照管
测定管
空白管
标准管
蒸馏水(μL)
10
样本(μL)
10
氯仿(μL)
10
标准品(μL)
10
试剂一(μL)
100
试剂二(μL)
40
充分振荡10min后,3000rpm,离心10min
上层溶液(μL)
50
试剂三(μL)
200
充分振荡2min后,静置15min,取0.2mL于微量比色皿/96孔板,在550 nm下测吸光值,分别记为A对照管、A测定管、A空白管、A标准管。(对照管和空白管各只做一管)
三、FFA含量计算:
1.标准曲线的绘制:
以标准溶液的浓度为x轴,以ΔA标准(ΔA=A标准管TUNEology 波长可调检测卡盒-->
