游离脂肪酸含量测定试剂盒 微量法-常用生化试剂-试剂-生物在线
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游离脂肪酸含量测定试剂盒 微量法

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产品名称: 游离脂肪酸含量测定试剂盒 微量法

英文名称: Micro Free Aliphatic Acid Content Assay Kit

产品编号: BC0595

产品价格: 0

产品产地: 北京市通州区马驹桥联东U谷85A三

品牌商标: Solarbio

更新时间: 2025-10-28T13:18:21

使用范围: null

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产品内容

    提取液:液体100 mL×1瓶,室温保存。

    试剂一:自备。实验前一天,取一个玻璃瓶,按照正庚烷:无水甲醇:氯仿=24:1:25的比例配置(自备),盖紧后混匀,室温保存。

    试剂二:液体6 mL×1瓶,室温保存。

    试剂三:粉剂×2瓶,4保存。临用前在试剂瓶中加入13mL无水乙醇,充分溶解,4可保存一周。

    标准品:粉剂×1瓶,10mg棕榈酸,室温保存。临用前把试剂转移到10 mL玻璃瓶中,加入7.8 mL氯仿充分溶解,即为mol/mL的棕榈酸标准溶液。

 

产品说明

    FFA既是脂肪水解的产物,又是脂肪合成的底物。血清中FFA的浓度与脂类代谢、糖代谢、内分泌功能有关。

    FFA与铜离子结合形成脂肪酸铜盐,并溶于氯仿;利用铜试剂法测定铜离子含量,即可推算出游离脂肪酸含量。

自备仪器和用品:

     研钵、冰、台式离心机、可调式移液枪、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、一个25 mL玻璃瓶、一个15mL玻璃瓶、正庚烷、无水甲醇、氯仿(****)、无水乙醇和蒸馏水。

 

操作步骤:

一、样品中FFA提取

1、血清中FFA测定:将所取血液,室温静置1 h 后,于4 离心机3500 rpm离心15min,取上层血清置于-20冰箱保存,待测。

2、组织中FFA含量测定:组织用生理盐水冲洗干净后,用吸水纸吸取表面水分,称取约0.1g,加入1.0 mL提取液,匀浆后,8000rpm4离心10min,取上清液,待测。

二、测定:

1. 分光光度计预热30 min以上,调节波长到550 nm无水乙醇调零。

2. 试剂二在37℃水浴中预热30 min以上。

3. 标准品的稀释:将标准品稀释成10.80.60.40.20.10.05μmol/mL

4. 按下表在1.5mL离心管中加入相应试剂

 

对照管

测定管

空白管

标准管

蒸馏水(μL

10

 

 

 

样本(μL

 

10

 

 

氯仿(μL

 

 

10

 

标准品(μL

 

 

 

10

试剂一(μL

100

试剂二(μL

40

充分振荡10min后,3000rpm,离心10min

上层溶液(μL

50

试剂三(μL

200

充分振荡2min后,静置15min,取0.2mL于微量比色皿/96孔板,在550 nm下测吸光值,分别记为A对照管、A测定管、A空白管、A标准管。(对照管和空白管各只做一管)

 

三、FFA含量计算:

1.标准曲线的绘制:

以标准溶液的浓度为x轴,以ΔA标准(ΔA=A标准管TUNEology 波长可调检测卡盒-->